快速蛋白锌染试剂盒
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产品编号
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规格
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运输
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RTD6206
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10 T
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RT
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● 产品组成： Ver.720359
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产品编号
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产品名称
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规格
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贮存
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运输
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RTD6206-01
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增强液（100×）
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5
ml
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RT
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RT
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RTD6206-02
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染色液（10×）
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60
ml
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4-8℃
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RT
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RTD6206-03
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显色液（10×）
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60
ml
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4-8℃
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RT
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RTD6206-04
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脱色液（10×）
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100
ml
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4-8℃
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RT
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说明书
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1份
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● 产品简介：
本试剂采用以锌离子为基础的负染色方法，用于SDS-PAGE或Native-PAGE电泳凝胶染色，不需要使用含有刺激性的甲醛和冰醋酸，实验方便快速，可以在30 min左右完成，最低能够检测出2 ng的蛋白条带，该方法不对蛋白质产生修饰作用，而且经过脱色液处理后，可以用于电洗脱或采用PAGE胶蛋白微量回收试剂盒（货号：RTD8108）进行胶回收，以便进行质谱和测序分析等，也可以用于电转移或用其他染色方法（银染或考染）对胶重新染色。
按照每次使用50 ml1×即用型染色液计算，本产品可以染色 8-10块mini-PAGE（8×10cm）胶。
● 储存条件
按照标签温度贮存，常温运输。开封后一年有效。
● 凝胶染色的操作步骤：
以下步骤以一块1 mm厚度8×10cm的凝胶操作为例。
一. 漂洗：
取出电泳后的 PAGE 凝胶，用超纯水漂洗两次，每次1分钟。
二. 染色：
2.1 准备1×即用型染色液：
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组份
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50 ml 1×即用型染色液
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染色液（10×）
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5
ml
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增强液（100×）
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0.5
ml
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超纯水
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定容至50 ml
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2.1凝胶染色：
凝胶中加入50 ml 1×即用型染色液，常温摇床慢摇10分钟。
注：增强液(100×)在低温条件下会产生白色沉淀，请在使用前60℃水浴中加热，震荡至完全溶解后使用。
三. 漂洗：
弃染色液，用超纯水漂洗凝胶两次，每次1分钟，至泡沫完全清除干净。
四. 显色：
4.1 准备工作：将显色液（10×）用超纯水稀释10倍，配成1×即用型显色液。
4.2凝胶中加入 50 ml 1×即用型显色液中，摇床慢摇30-60秒。观察结果：在黑色背景下，可见光观察，蛋白条带为棕褐色，无蛋白区域为类白色；可见光灯箱观察（凝胶底部打光），蛋白质条带反显白色，无蛋白的胶区则为白色。
五. 漂洗：
弃显影液，超纯水洗涤凝胶2次，每次摇床慢摇1分钟。
注：凝胶可以在水中保存1-2周。
六. 脱色：
6.1 准备工作：将脱色液（10×）用超纯水稀释10倍，配成1×即用型脱色液。
6.2 如需要进行蛋白切胶回收，将所需的蛋白质条带切下，用超纯水漂洗切下的凝胶一次；如凝胶需要考染，银染或转膜实验，直接用超纯水漂洗整个凝胶一次。
6.3 弃水，凝胶中加入适量1×即用型脱色液覆盖凝胶，摇床慢摇5分钟，倒掉脱色液；
6.4 重复脱色步骤2次。脱色完全的标志是白色凝胶完全脱色为无色透明。
6.5 超纯水漂洗凝胶两次，进行后续实验操作。
● 实验示例：
4-20% RealPAGE Precast Gel
lane 1-4: BSA 10μg
M：RTD6149 10-250kD
lane 5: Bacterial Lysis
凝胶显影后(脱色前)蛋白条带在黑色背景下为棕褐色
可见光灯箱观察（凝胶底部打光），蛋白质条带反显白色